茂师兄带你做实验大脑中动脉栓塞模型制
2018-7-28 来源:本站原创 浏览次数:次大家好,欢迎收看本期的茂师兄带你做实验。一段时间没见,大家有健康的生活着吗?茂师兄我最近可不太好……工作压力大睡眠不足,每天起来的时候半边身子都是瘫痪的,感觉中风、瘫痪、帕金森三位一体的全来了。迫于那帮傻x人类的淫威,今天就在这里教大家一种关于模拟中风患者发病情况的模型构建——大脑中动脉栓塞模型,即是俗称的MCAO模型。
人类有25%的缺血性中风都是有大脑动脉堵塞引起的。在以往的研究中,我们发现,缺血造成的损伤远不如再灌注造成的损伤大。所以我们设计了一个堵塞血管造成局部大脑缺血,又可以在体外无需再次手术的情况下,完成对缺血大脑的再灌注。
MACO该实验从颈外动脉插入栓线,颈内动脉到大脑前动脉,阻断颈外动脉机器分支,且阻断翼腭动脉,以切断颅外来源的侧副循环血流,阻断大脑的动脉供血。如果需要再灌注,只需拔出栓线结扎伤口,即可恢复大脑血供。
实验前准备
器材
手术器械(长剪,眼科剪,眼科镊,外科镊,止血钳,持针器,伤口固定器,刺针),固定器,五号线,16号针,鱼线。
试验台
显微操作台,保温装置。
试剂
水合氯醛或异氟烷或氯氮平(麻醉剂)。
线栓制备
选用0.2-0.3mm的医用尼龙绳或者用鱼线代替,最好备有三种不同直径的线栓以备不时之需。处理方法可用明火或者砂纸上摩擦的方式,使头端变钝,在线栓表层可以涂层石蜡或者清漆,提高润滑度和封闭效果。石蜡封闭法介绍:取一段5cm长的鱼线,在一端以及2cm、2.2cm处分别用记号笔作一个标记,垂直在熔化的石蜡中迅速浸入并提起,立即凝固的一薄层石蜡可牢固地粘附在鱼线一端的表面。
大鼠术前处理
选用-g的大鼠,雌雄不限,提前一天进行正常饲养,保持足够的水源和食物供应以及环境舒适。
实验步骤
1麻醉采用4%水合氯醛腹腔注射,8ml/kg。
2手术1,将大鼠麻倒后置于手术台,用固定器将四肢固定,用橡皮筋牵引上门牙,使头部扬起,充分暴露颈部。
2,剪去颈前的毛,并用75%酒精消毒。
3,经颈部正中纵向切开皮肤,伤口长度2-3cm。
4,钝性分离皮下组织,分离两侧鼓泡腺体(一般会被误认为扁桃腺)。
5,沿胸锁乳突肌内缘分离肌肉和筋膜,暴露颈总动脉及分支。
6,分离到气管前肌后,沿右侧胸锁乳突肌腱向下分离,见到颈动脉鞘后可放置伤口固定器。
7,分离动脉鞘,分离好后见光滑的颈总动脉(注意:颈总动脉向远心端依次分离出颈外动脉、甲状腺上动脉、枕下动脉以及颈内动脉,在颈外动脉及枕下动脉穿双线备用)。
8,分离出颈总、颈外、颈内动脉,结扎颈总、颈外动脉,但颈总动脉处不要扎紧,用来插鱼线时防止出血的。
9,夹闭颈内动脉,用刺针将颈总动脉刺一小口。
10,从小口处通入鱼线,用眼科镊向为内上方轻推栓线,从血管分叉处开始算距离,当插入深度到达鱼线的标记处时,扎紧固定线,此时可见,第一个标记距动脉分叉约2mm。
11,缝合并消毒伤口,将鱼线用粘胶固定在表皮。
12,将大鼠放回笼中,饲养。
13,2小时后,小心将鱼线拔出,造成大脑缺血再灌注损伤。
实验评估
在大鼠苏醒后,观察实验动物的行为,并进行评分,分数越高,行为障碍越严重——
0分:无神经损伤症状;
1分:不能完全伸展对侧前爪;
2分:向对侧转圈;
3分:向对侧倾倒;
4分:不能自发行走,意识丧失。
实验小贴士
●小心分离血管,迷走神经有一根分支斜跨总动脉,如果没必要的话,建议不要分离这处血管和神经,在此处的尖端和尾端个分离一处穿线,毕竟能减少损伤降低术后死亡率。
●尽量不要分离结扎翼腭动脉,因为此动脉位置较深,分离的话损伤较大,并且需要较多时间来做这个工作.如果线栓较好,一般可以顺利进入颅内.个别大鼠实在进入去,可以略加分离,用镊子夹住翼腭动脉,让线栓不要进入翼腭动脉可入颅。
●尽量减少出血,有一个小技巧,在颈总切口上部打一个活结,待线栓插进颈动脉分叉处时把活结稍稍打紧,再松开动脉夹,此时把线栓送入颈内动脉,入颅,但不要插到应该插的深度,这时稍稍松开切口上的那个活结,减少因这个活结所引起的送栓阻力,这时轻轻地把线栓插到位,再把活结扎紧,并打死结,防止线栓滑出。
●保证线栓插入颅内的深度,一般要求在颈动脉分杈以上要有18-20mm,太浅会没有梗塞,太深梗死灶太大(因为大脑前动脉也会被阻止血供)或者出血。
可能发生的问题和解决方法好的,以上就是今天的分享内容。这次的实验难度比以往的实验都要高一些,level都不一样,手术步骤这里今天就不细分小标题了,像现在这样大家跟着一步步来进行脑补模拟以及实操会更加容易操作些,重点注意事项和提示都在上面了,剩下的就都是需要大家多进行脑补、多观看相关视频以及多练习了。希望大家的实验能顺利完成!往期分享可在白癜风的病因北京最好白癜风医院